Western blot

Le Western blot est une méthode largement utilisée pour la détection d’une protéine spécifique dans une matrice complexe telle qu’un lysat cellulaire ou tissulaire (c’est-à-dire des extraits de protéines). Le protocole Western Blot utilise l’électrophorèse sur gel (SDS-PAGE ou PAGE native) pour séparer les protéines en fonction de leur poids moléculaire. Les protéines sont ensuite transférées du gel sur une membrane (généralement de la nitrocellulose ou du PVDF). La membrane est bloquée avec un tampon bloquant les protéines pour empêcher une liaison non spécifique, puis sondée à l’aide d’un anticorps primaire pour détecter la protéine d’intérêt, suivie d’une incubation avec un anticorps secondaire conjugué à une molécule reporter.